高二生物實(shí)驗分析經(jīng)典方法

　　1.實(shí)驗分析的一般方法——"四步分析法"

　　筆者在實(shí)驗教學(xué)過(guò)程中，注重培養學(xué)生實(shí)驗分析的能力，并就實(shí)驗分析的方法進(jìn)行了初步探索，總結歸納成了"四步分析法"，即從取材、藥品與試劑、步驟及操作、顯微鏡的使用四個(gè)方面對實(shí)驗進(jìn)行分析的方法。

　　1.1第一步：取材分析

　　正確取材是實(shí)驗成功的第一步。有的學(xué)生實(shí)驗失敗的原因，往往是取材不正確而引起的，因而在實(shí)驗分析時(shí)，要首先考慮取材是否正確。例如，實(shí)驗一"觀(guān)察植物細胞的有絲分裂"（以下簡(jiǎn)稱(chēng)"實(shí)驗一"）中，準確切取洋蔥根尖生長(cháng)點(diǎn)部位，是實(shí)驗成功的前提。一些學(xué)生制成的裝片中往往看不到或看到很少的分裂相細胞，就是因為切取部位正確導致的，即沒(méi)有選準根尖的生長(cháng)點(diǎn)部位。實(shí)驗二"觀(guān)察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原"（以下簡(jiǎn)稱(chēng)"實(shí)驗二"）中，取材部位應該是在新鮮的洋蔥鱗片葉外表皮的紫色較深處。而在內表皮或紫色很淺的部位取材，往往觀(guān)察不到或僅有很少紫色液泡。實(shí)驗三"觀(guān)察根對礦質(zhì)元素離子的交換吸附現象"（以下簡(jiǎn)稱(chēng)"實(shí)驗三"）中，剪取的是有活性的根，如果是死根、爛根，則觀(guān)察不到預期的結果。實(shí)驗四"葉綠體色素的提取的提取和分離"（以下簡(jiǎn)稱(chēng)"實(shí)驗四"）中，選取的時(shí)片要肥厚、色濃，而老葉、發(fā)黃的葉子則不能選齲

　　1.2第二步：藥品與試劑分析

　　藥品與試劑的量、濃度、純度等都是影響實(shí)驗正確結果的重要因素，要逐一檢查，不能忽視。

　　1.2.1關(guān)于量的問(wèn)題。有些實(shí)驗對藥品與試劑的量有一定的要求，如實(shí)驗四中，丙酮、層析液的量就要按規定使用：提取5g葉片中的色素，用2ml丙酮是適中的，若丙酮過(guò)多，會(huì )使色素濃度降低，減少濾紙條上色素的量，使分離效果不明顯；若丙酮少了，色素提取又不充分。色素分離時(shí)，向燒杯中例入層析液時(shí)，其量的標準是液面不能超過(guò)1cm（距燒杯底），否則將沒(méi)及濾紙條上的濾液細線(xiàn)，色素就迅速溶解到層析液中去了，結果在濾紙條上得不到相應的色素分離圖譜。

　　1.2.2關(guān)天濃度問(wèn)題。實(shí)驗中，規定的濃度，都是人們經(jīng)過(guò)多次試驗后，認為最適合的。實(shí)驗員在實(shí)驗前配制藥品與試劑時(shí)，濃度要配準，否則將會(huì )影響學(xué)生實(shí)驗。如蔗糖溶液濃度較高時(shí)（高于30％），會(huì )使細胞因發(fā)生強烈質(zhì)壁分離而失水過(guò)多，細胞死亡，不能復原。亞甲基藍溶液在配制時(shí)，要求更高，濃度高一點(diǎn)點(diǎn)，就會(huì )影響根的活性。

　　1.2.3關(guān)于純度問(wèn)題。有的實(shí)驗如實(shí)驗三對試劑的純度有蔣高的要求，如果所用蒸餾水中混入雜質(zhì)陽(yáng)離子，或用自來(lái)水代替，則漂洗時(shí)，不僅洗去了浮在根細胞表面的亞甲基藍陽(yáng)離子，而且也會(huì )把吸附在根細胞表面的亞甲基藍陽(yáng)離了交換下來(lái)；在對比實(shí)驗中，含雜質(zhì)陽(yáng)離子的蒸餾水也會(huì )變藍。

　　1.3第三步：步驟及操作分析步驟及操作是否正確是影響實(shí)驗結果的主要因素，故應重點(diǎn)分析，主要有以下三種情況。

　　1.3.1漏做某個(gè)實(shí)驗步驟。實(shí)驗步驟不能少，如實(shí)驗一中，根尖用10％鹽酸解離后，若不經(jīng)漂洗直接染色，則染色效果極差，因為根尖上附著(zhù)的鹽酸將和堿性染料起中和反應，從而影響著(zhù)色；制片時(shí)，用鑷子尖把根尖開(kāi)碎，這一步也易漏掉。實(shí)驗三中根經(jīng)亞甲基藍染色后，若不用蒸餾水反復沖洗，在后面的對比實(shí)驗中，蒸餾水也將變藍。

　　1.3.2操作方法錯誤。在具體操作某個(gè)步驟時(shí)，沒(méi)有按規定的操作方法做，肯定會(huì )影響實(shí)驗結果。如臨時(shí)裝片制作時(shí)，有的學(xué)生將蓋玻片直接放在清水滴上，這樣制成的裝片中，氣泡較多，嚴重影響觀(guān)察。實(shí)驗二中，應用鑷子撕取洋蔥表皮，而不少學(xué)生是用刀片削或挖，以至取出的表皮較厚，這樣在顯微鏡下也就看不到單層細胞。

　　1.3.3操作不嚴格。如解離、染色時(shí)間不夠，漂洗的時(shí)間或次數不足。制作洋蔥表皮臨時(shí)裝片時(shí)，未將清水滴中卷起的表皮平展開(kāi)來(lái)；做質(zhì)壁分離復原實(shí)驗時(shí)，滴入清水的次數少，濾液細線(xiàn)劃得不細不齊都會(huì )對實(shí)驗果有一定的影響。

　　1.4第四步：顯微鏡的使用分析需用顯微鏡的實(shí)驗，有時(shí)會(huì )因為顯微鏡的操作，鏡頭污染等問(wèn)題，而影響觀(guān)察，看不到已經(jīng)出現的現象或結果。

　　顯微鏡的操作要按一定的程序進(jìn)行，如對光程序、高倍鏡觀(guān)察程序等。有的學(xué)生不按程序操作，結果既耽誤了時(shí)間，又觀(guān)察不到相應的結果，而且易損壞顯微鏡。例如常有學(xué)生在用高倍鏡觀(guān)察時(shí)，把蓋玻片壓碎了，弄臟了鏡頭，就是由于這些學(xué)生在下降鏡筒時(shí)，眼睛看的是目鏡而不是物鏡，這樣，鏡筒下降到什么位置就不知道了。正確的程序應該眼睛看著(zhù)物鏡，同時(shí)下降鏡筒，讓物鏡接近裝片，然后眼看目鏡、調節細準焦螺旋直至觀(guān)察到清晰物像。此外，目鏡或物鏡頭被嚴重污染、焦距沒(méi)有調好、放大倍數不夠、視野較暗、標本不在通光孔的中心位置等諸多因素，都會(huì )直接影響觀(guān)察。

　　以上介紹的"四步分析法"緊扣教材，貼近學(xué)生的知識水平，符合學(xué)生的思維習慣，容易被學(xué)生接受并掌握，而且經(jīng)過(guò)嘗試，也取得了良好的效果。因此，該方法可以作為高中生物實(shí)驗分析的一般方法。

　　2"四步分析法"的應用"四步分析法"可以在實(shí)驗課上講授，也可以在實(shí)驗（理論）專(zhuān)題復習課中講授。在具體的實(shí)驗分析或解題過(guò)程中，既可順次運用，亦可綜合運用，具體問(wèn)題，靈活分析。

　　例1.實(shí)驗一中，在顯微鏡視野里，幾乎看不到分裂相細胞，試分析其原因。

　　分析：①從取材角度看，可能是沒(méi)有取準生長(cháng)點(diǎn)部位導致的；②從步驟及操作角度看，可能是沒(méi)有壓片過(guò)程導致標本太厚，看不到單層細胞；③從顯微鏡使用角度看，可能是沒(méi)有移動(dòng)尋找。

　　例2.實(shí)驗二中，質(zhì)壁分離后進(jìn)行復原時(shí)發(fā)現復原效果較差，其原因可能有哪些？

　　分析：①蔗糖溶液在配制時(shí)，濃度過(guò)大，質(zhì)壁分離強烈，細胞失水過(guò)多而死亡；②質(zhì)壁分離時(shí)間長(cháng)了，未及時(shí)復原，細胞死亡；③滴入清水次數少或只滴入一次。

　　例3.實(shí)驗三中，在做對比實(shí)驗時(shí)，蒸餾水也變藍了，分析其原因。

　　分析：①是沒(méi)有漂洗或漂洗次數少；②是蒸餾水中混入了雜質(zhì)陽(yáng)離子。