高二生物教案：《基因工程的基本操作程序》教學(xué)設計(2)
來(lái)源：網(wǎng)絡(luò )整理 2018-11-16 20:58:51
4、
�、偈紫纫獧z測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 技術(shù)。
�、谄浯芜�要檢測目的基因是否轉錄出 ，方法是采用RNA分子雜交技術(shù)。
�、圩詈髾z測目的基因是否翻譯成 ，方法是采用 雜交技術(shù)。
�、苌鲜鋈綑z測為分子水平的檢測，還可以進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定，如抗蟲(chóng)或抗病的鑒定等。
基因工程的意義：能夠打破生物種屬的界限，即 ，在分子水平上 改變生物的遺傳特性。
【疑難解析】
1、核心操作基因表達載體構建的注意事項①載體與表達載體的區別：二者都有標記基因和復制原點(diǎn)兩部分DNA片段。表達載體在載體基礎上增加了目的基因、啟動(dòng)子、終止子三部分結構②用到的工具酶：既用到限制酶切割載體，又用到DNA連接酶將目的基因和載體拼接，兩種酶作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵③啟動(dòng)子、終止子對于目的基因表達必不可少④目的基因不能單獨進(jìn)入受體細胞，必需以表達載體的方式攜帶進(jìn)去。
2、DNA復制與PCR技術(shù)的比較
PCR技術(shù)DNA復制
相同點(diǎn)原則堿基互不配對
原料四種脫氧核苷酸
條件模板、能量、酶
不同點(diǎn)解旋方式DNA在高溫下變性解旋解旋酶催化
場(chǎng)所體外復制細胞核內
酶熱穩定的DNA聚合酶細胞核內的DNA聚合酶
結果大量的DNA片段整個(gè)DNA分子
3、①目的基因檢測，利用DNA分子雜交技術(shù)，提取受體細胞中的DNA，然后高溫解成單鏈，再與同位素標記的DNA探針雜交看是否有雜交帶;②mRNA檢測，利用RNA分子雜交技術(shù)，目的基因DNA一條鏈(作探針)與受體細胞中提取的mRNA雜交看是否有雜交帶;③抗原-抗體雜交所用到的抗體是用表達出的蛋白質(zhì)注射動(dòng)物進(jìn)行免疫，產(chǎn)生相應的抗體，并提取出而來(lái)的。
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